NDV原理和用途
新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)属于副粘病毒科Avulavirus属,是一种负链包膜RNA病毒,其基因组包含N、P、M、F、HN和L六大基因以及非编码调控序列(图1)。具有良好的稳定性。作为RNA病毒,NDV与宿主细胞DNA重组的可能性十分有限。与其他病毒载体相比,NDV病毒载体由于宿主范围的限制,具有良好的安全性,同时,除养殖场专业作业人员外,人群体内没有预先存在的NDV抗体。
图1 NDV病毒基因组示意图
NDV载体的构建方法
NDV(新城疫病毒)载体的构建主要基于反向遗传操作技术(Reverse Genetics),该技术是一种通过操作病毒遗传物质(如cDNA克隆)重构活病毒,从而研究基因功能或开发新型疫苗的方法(图2)。流程包括:①提取病毒RNA并逆转录为cDNA;②将cDNA插入特定载体(如质粒或痘苗病毒载体);③通过基因编辑(插入/缺失/突变外源基因)修饰基因组;④将修饰后的遗传物质转染宿主细胞,拯救重组病毒。
图2.病毒反向遗传操作技术
目前,临床前早期研究已经报道了多种以NDV为载体携载外源抗原基因所形成的重组病毒疫苗(表1&2)。
表1.抗人类病原体的NDV载体疫苗
表2.抗兽医病原体的NDV载体疫苗
NDV载体作为疫苗载体在禽类和非禽类物种中具有高度安全性
在人用疫苗中的安全性:
低致病性:由于人类正常细胞缺乏NDV复制所需酶,病毒无法有效增殖,所以NDV主要感染禽类,对人类致病性极低。
无基因组整合风险:作为RNA病毒,NDV在宿主细胞质内复制,不与宿主DNA整合,避免基因突变风险。
缺乏预存免疫:因宿主范围受限,人类普遍无NDV抗体,可避免免疫干扰导致的疫苗失效(对比腺病毒载体)。
在兽用疫苗中的安全性:
成熟的禽用疫苗基础:NDV弱毒疫苗(如La Sota株)广泛用于家禽,安全性记录明确。
跨物种安全性:在哺乳动物(小鼠、豚鼠、猫、狗等)模型中,NDV载体诱导免疫应答的同时未报告显著毒性。
关于DIFF NDV载体构建服务:
迪福润丝NDV载体构建优势
服务案例:迪福润丝NDV溶瘤病毒候选株对成瘤小鼠肿瘤的抑制作用
图3.以NDV为载体的改造溶瘤病毒候选株(NDV-OV1,NDV-OV2,NDV-OV3)给药后,成瘤小鼠肿瘤体积变化。A:LLC成瘤小鼠;B:B16F10成瘤小鼠。
迪福润丝载体构建类技术服务目录:
参考文献:
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